Ako vedci izolujú DNA, aby ju mohli študovať?

Ako vedci izolujú DNA, aby ju mohli študovať?
Anonim

odpoveď:

Existuje niekoľko krokov, ako to urobiť, prosím, ignorujte moju zlú angličtinu, dúfam, že stále môžete pochopiť proces.

vysvetlenie:

To nie je také ťažké, ako si myslíte.

Povedzme, že chceme izolovať DNA z teľacieho týmusu, musíte postupovať podľa týchto inštrukcií (sú rovnaké pre jablko, pokiaľ viem, ale existujú malé rozdiely):

  1. Vezmite 3 kusy 3 gramy a nakrájajte na malé kúsky, čo možno najmenšie.

  2. Vložte ho do mixéra s 75 ml citrátu sodného (SSC) na kus a uistite sa, že čepeľ mixéra je úplne pokrytá SSC, takže ak potrebujete, pridajte kúsok týmusu.

    SSC zaisťuje rozpustenie bunkových membrán.

    Miešajte, kým nebude všetko hladké.

  3. Vložte ju do skúmavky pre odstredivku a odrežte ju s inou skúmavkou, aby sa odstredivka nerozbila

  4. Skúmavka sa umiestni do odstredivky na 20 minút pri 5000 ot / min

  5. Keď z skúmavky vytiahnete skúmavky, mali by ste vidieť dve zložky. Dno má pevnú látku, ktorá sa nazýva peleta a ktorá drží bunkové jadrá s DNA. Uvidíte tiež kvapalnú látku, ktorá sa nazýva supernatant a ktorá sa skladá z SSC s rozpustenými bunkovými membránami.

  6. Odstráňte supernatant v jednom pohybe tekutiny, toto sa nazýva dekantácia a toto vám ponecháva peletu.

  7. Vložte malé množstvo 2,2 M NaCl do skúmavky s peletou tak, aby bola peleta práve pokrytá NaCl. NaCl spôsobuje precipitáciu proteínov, ktoré obklopujú DNA.

  8. Miešajte s prázdnou skúmavkou alebo miešacím tiahlom. Nakoniec by ste mali dostať dve komponenty. Proteíny na dne a viskózna kvapalina navrchu.

  9. Viskóznu tekutinu vyberte pipetou a uistite sa, že s viskóznou tekutinou neberiete žiadne proteíny. (veľmi malé kúsky bielkovín je veľmi ťažké vyhnúť sa, ale snažte sa vyhnúť čo najväčšiemu počtu proteínov)

  10. Vložte viskóznu tekutinu, ktorú ste pipetovali do kadičky a pridajte k nej 2x toľko etanolu. Ale jemne pridajte etanol, pretože nechcete miešať s DNA. Na rozhraní medzi etanolom a viskóznou tekutinou by ste mali vidieť bubliny DNA.

  11. Jemne premiešajte sklenenou tyčinkou, DNA je záporne nabitá, aby sa prilepila k tyči.

  12. Vložte ju do skúmavky a rozpustite ju pomocou SSC.

Špeciálny stroj vám potom môže povedať, koľko DNA ste izolovali a aký je čistý.