odpoveď:
Udržať ich neporušené …
vysvetlenie:
Reštrikčné enzýmy sa používajú vo veľmi malých množstvách, ale zvyčajne sa nakupujú v mierne väčších dávkach.
Ak za nič iné, zvyčajne uprednostňujete rôzne testy s tou istou dávkou. Nakúpená dávka sa preto musí skladovať dlhšiu dobu.
Väčšina enzýmov je vo svojom pufri dokonale šťastná pri 4 stupňoch Celzia na chvíľu, ale nakoniec sa degraduje. Obvykle je akceptovaný limit 24 hodín.
Pri dlhodobejšom skladovaní musí byť šarža zmrazená. -20C je štandard a bude ho uchovávať niekoľko mesiacov. Pre ešte dlhšie obdobia (napr. Jeden alebo viac rokov) je normou -70 ° C.
Je potrebné ju rýchlo zmraziť a v malých nádobách (napr. Eppendorfových), aby sa zabránilo rozmrazeniu / opätovnému zmrazeniu príliš často.
Aby sa predišlo poškodeniu proteínu pri takýchto nízkych teplotách, môžu / môžu sa pridať stabilizátory, ako napríklad DTT (di-tio-treitol), sérový albumín a čo je najdôležitejšie, glycerol (5-50%).
Napodiv, pri -20 ° C je nutné použiť 50% glycerol, zatiaľ čo pri -70 Glycerol nie je naozaj potrebný, aj keď jeho pridanie môže pomôcť stabilizovať proteín.
Na vykonanie vedeckého experimentu je potrebné, aby študenti zmiešali 90 ml 3% roztoku kyseliny. Majú k dispozícii 1% a 10% roztok. Koľko ml 1% roztoku a 10% roztoku by sa malo skombinovať, aby sa získalo 90 ml 3% roztoku?
Môžete to urobiť s pomermi. Rozdiel medzi 1% a 10% je 9. Musíte ísť z 1% na 3% - rozdiel 2. Potom musí byť prítomný 2/9 silnejšieho materiálu, alebo v tomto prípade 20mL (a kurz 70mL slabších vecí).
Prečo je dôležité, aby sa na štiepenie (rezanie) DNA oboch organizmov použitých na vytvorenie transgénneho organizmu použil rovnaký reštrikčný enzým?
Pozri nižšie ... Reštrikčné enzýmy štiepia v špecifických sekvenciách, takže sa musí použiť rovnaký reštrikčný enzým, pretože bude produkovať fragmenty s rovnakými komplementárnymi lepkavými koncami, čo umožní, aby sa medzi nimi vytvorili väzby.
Prečo musíte použiť rovnaký reštrikčný enzým na bunke dna a na plazmide?
Reštrikčná endonukleáza identifikuje a štiepi tú istú palindromickú sekvenciu v DNA aj vo vektore, v dôsledku čoho keď sa zmiešajú, ich komplementárne bázy sa spoja a vytvoria r-DNA. medzi sebou, pretože ich základy sa nezhodujú.