odpoveď:
Pozri nižšie…
vysvetlenie:
Reštrikčné enzýmy sa štiepia v špecifických sekvenciách, takže sa musí použiť rovnaký reštrikčný enzým, pretože bude produkovať fragmenty s rovnakými komplementárnymi lepkavými koncami, čo umožní, aby sa medzi nimi vytvorili väzby.
Existujú určité kompatibilné reštrikčné lokality, ktoré sa môžu používať spoločne. Príklady Xho1 a Sal1 sú príklady. Ich lepkavé konce sa zhodujú, a tak sa môžu spojiť. Ale ligácia zabíja Xho1 aj Sal1 stránky, takže nemôžete použiť ani jeden z nich na to, aby ste ich znovu rozrezali (na miestach ligácie).
Na vytvorenie lepkavých koncov môžete použiť aj exonukleázu alebo PCR (5)
alebo 3
previsy) do tupých miest - týmto spôsobom môžete ligovať do tupého miesta - ale to bude všeobecne zabiť tupé miesto, rovnako.
Prečo sú reštrikčné enzýmy dôležité pre technológiu rekombinantnej DNA?
Reštrikčný enzým je hlavným nástrojom rekombinantného dna technolog - všetky reštrikčné enzýmy kontrolujú molekulu DNA v sérii špecifických rozpoznávacích sekvencií. Akonáhle dostane špecifickú rozpoznávaciu sekvenciu, viaže sa na miesto a rozreže každý z dvoch reťazcov dvojzávitnice v špecifických bodoch hydrolýzou fosfodiesterových väzieb. OBMEDZUJÚCE ENZÝMY SA VYZÝVAJÚ AKO MOLEKULOVÉ SKÚŠKY.
Prečo je pre reštrikčné enzýmy dôležité, aby rozpoznali palindromické sekrecie?
Napriek tomu, že ide o endonukleázu, t.j. enzým štiepiaci nukleovú kyselinu, reštrikčná endonukleáza náhodne neničí molekulu DNA. Enzýmy sa štiepia iba v palindromických sekvenciách za vzniku menších fragmentov DNA. Reštrikčné enzýmy sa používajú na rezanie kruhovej molekuly DNA prokaryotického pôvodu. Tento typ endonukleázy často produkuje lepkavé konce, ktoré pomáhajú pri vytváraní rekombinantnej DNA, to znamená, že do rezu sa môže vložiť cudzí fragment DNA (obsahujúci požadovaný
Prečo musíte použiť rovnaký reštrikčný enzým na bunke dna a na plazmide?
Reštrikčná endonukleáza identifikuje a štiepi tú istú palindromickú sekvenciu v DNA aj vo vektore, v dôsledku čoho keď sa zmiešajú, ich komplementárne bázy sa spoja a vytvoria r-DNA. medzi sebou, pretože ich základy sa nezhodujú.