Čo je to western blotting?

Čo je to western blotting?
Anonim

odpoveď:

Je to použitie protilátok na detekciu proteínov, ktoré boli oddelené pomocou SDS-PAGE a potom prenesené na membránu.

vysvetlenie:

Bunky obsahujú zmes proteínov (mnoho tisíc) a tieto môžu byť separované pomocou SDS-PAGE.

Proteíny z SDS-PAGE sa potom prenesú pomocou elektrického poľa z gélu na membránu, ktorá je typicky vyrobená z nitrocelulózy alebo polyvinylidénfluoridu (PVDF).

Membrána je sondovaná primárnou protilátkou špecifickou pre daný proteín. Na detekciu primárnej protilátky sa potom použije sekundárna protilátka. Sekundárna protilátka bude obsahovať marker, ktorý môže byť detegovaný chemickou reakciou, aby buď poskytol viditeľný pás na membráne, alebo signál, ktorý môže byť zachytený špecializovanou kamerou.

Ak je to potrebné, môžem túto odpoveď rozšíriť do veľkej hĺbky, keď som počas svojej kariéry vykonal niekoľko stoviek západných blotov.