odpoveď:
- reštrikčný enzým je hlavným nástrojom rekombinantného dna technológu
vysvetlenie:
- všetky reštrikčné enzýmy kontrolujú molekulu DNA v sérii špecifických rozpoznávacích sekvencií. Akonáhle dostane špecifickú rozpoznávaciu sekvenciu, viaže sa na miesto a rozreže každý z dvoch reťazcov dvojzávitnice v špecifických bodoch hydrolýzou fosfodiesterových väzieb.
OBMEDZUJÚCE ENZÝMY SA VYZÝVAJÚ AKO MOLEKULOVÉ SKÚŠKY
PBR322 je plazmid, ktorý má dve reštrikčné miesta pre EcoRI, zatiaľ čo T4 fágová DNA pre neho obsahuje tri reštrikčné miesta. Na tieto dve DNA sa pôsobilo EcoRI a nechali sa bežať na agarózovom géli. Aký druh vzoru sa získa na géli?
Neplatná otázka, T4 má okolo 40 miest pre EcoR1, nie 3 ... pBR322 má iba 1 miesto pre EcoR1, medzi génom faktoru rezistencie AMP a génom TET ... Trávenia T4: (ďakujem, Springer Verlag!) obrázok z http://link.springer.com/article/10.1007/BF00272920 © Springer-Verlag 1981 Ak je však vaša otázka hypotetickejšia: pBR322 aj genómy T4 sú kruhové, takže: pBR322: 2cuts = 2 fragmenty, T4: 3 reťazce = 3 fragmenty. Na agarózovom géli by ste videli 2 pásy v pBR-pruhu, 3 pásy v T4-pruhu, UNLESS 2 alebo viac fragmentov majú rovnakú alebo takme
Prečo sú pre odoberanie odtlačkov prstov dôležité reštrikčné enzýmy?
Reštrikčné enzýmy budú rezať molekulu DNA len na špecifickom vzore báz. (ako je znázornené na obrázku) Pretože všetky organizmy (z nezávislých zygotov) majú jedinečnú DNA, reštrikčné enzýmy rozštiepia DNA v rôznych polohách a rôznych frekvenciách. To má za následok rôzne počty "kusov" rôznych dĺžok / veľkostí. Polymorfizmy s reštrikčnou fragmentovou dĺžkou (RFLP) je analýza fragmentov produkovaných z daného reštrikčného enzýmu - fragmenty sú čiastočne nabité a budú
Prečo je dôležité, aby sa na štiepenie (rezanie) DNA oboch organizmov použitých na vytvorenie transgénneho organizmu použil rovnaký reštrikčný enzým?
Pozri nižšie ... Reštrikčné enzýmy štiepia v špecifických sekvenciách, takže sa musí použiť rovnaký reštrikčný enzým, pretože bude produkovať fragmenty s rovnakými komplementárnymi lepkavými koncami, čo umožní, aby sa medzi nimi vytvorili väzby.