odpoveď:
Western blot (proteínový imunoblot) je široko používanou analytickou technikou používanou na detekciu špecifických proteínov vo vzorke tkanivového homogenátu alebo extraktu.
vysvetlenie:
Kľúčové prvky potrebné na splnenie tejto úlohy sú:
- separácia proteínových zmesí podľa veľkosti použitím gélovej elektroforézy.
- účinný prenos separovaných proteínov na pevný nosič.
- špecifická detekcia cieľového proteínu približne zodpovedajúcimi protilátkami.
Schopnosť Western blotov jasne ukázať prítomnosť špecifického proteínu, a to tak veľkosťou, ako aj väzbou protilátky, ich robí vhodnými na hodnotenie hladín proteínovej expresie v bunkách na monitorovanie frakcií počas purifikácie proteínu.
V mnohých prípadoch sa Western bloty používajú v kombinácii s inými kľúčovými protilátkami založenými na detekčných technikách, ako je ELISA alebo imunohistochémia.
Čo je test Western blot HIV?
Enzymová imunoanalýza (ELISA), známa aj ako enzýmová imunoanalýza (EIA). Séria krvných skríningov sa vykonáva na testovanie na HIV. Enzymová imunoanalýza (ELISA), známa aj ako enzýmová imunoanalýza (EIA), je prvým testom, ktorý vám poskytovateľ zdravotnej starostlivosti nariadi na skríning HIV. ELISA, podobne ako Western blot test, detekuje HIV protilátky vo Vašej krvi.
Aký by mohol byť problém, ak sa kapely neobjavia v programe Western Blot?
Veľa ... Existuje mnoho dôvodov, prečo sa kapely nemusia objavovať na western blote. Pracovala vzorka a kombinácie protilátok v minulosti? Nižšie sú len niektoré, o ktorých si v súčasnosti myslím, že môžu spôsobiť, že sa kapely neobjavia: Prenos proteínu z gélu? Skúste zafarbiť membránu niečo ako ponceau S alebo amido black, aby ste zistili, či sú prítomné kapely. Niekedy môžete vidieť proteínové pásy na membráne zmáčaním a držaním v uhle voči svetlu. Pracuje primárna protilátka? To je ťažk
Prečo sa GAPDH používa v Western Blot? + Príklad
GAPDH sa často používa ako kontrola zavádzania. Pri Western blote často používame GAPDH ako kontrolu zavádzania. To znamená, že sondovaním na GAPDH môžeme overiť, že máme naložené dráhy ekvivalentných množstiev proteínov na rôznych dráhach blotu. Príklad použitia - povedzme, že máme ochorenie, o ktorom si myslíme, že spôsobuje zvýšenie určitého proteínu v bunke. Vytvorili by sme vzorku zo „zdravých“ buniek a ďalšiu vzorku z „chorých“ buniek. Potom by sme naložili ekvivalentné proteínové množstv&