Čo je to SDS-PAGE proteínov?

Čo je to SDS-PAGE proteínov?
Anonim

odpoveď:

Je to separácia proteínov na základe ich molekulovej hmotnosti.

vysvetlenie:

SDS-PAGE je separácia proteínov v elektrickom poli na základe ich molekulovej hmotnosti.

Proteíny sa denaturujú zahrievaním na teplotu medzi 70 a 100 ° C v prítomnosti zlúčenín, ako je 2-merkaptoetanol alebo ditiotreitol, a SDS (dodecylsulfát sodný). Merkaptoetanol alebo ditiotreitol rozbijú disulfidové väzby v proteíne a spôsobia, že sa rozvinú a stanú sa lineárnymi (ako dlhý reťazec bez záhybov). KBÚ pomôže proces rozvíjania a tiež pokryje proteín v zápornom náboji.

Zmes sa potom aplikuje na polyakrylamidový gél (PAGE bit v SDS-PAGE) a aplikuje sa elektrický prúd. Negatívne nabité proteíny sa budú pohybovať v elektrickom poli. PAGE zabráni tomu, aby sa väčšie proteíny pohybovali veľmi rýchlo v porovnaní s malými proteínmi (PAGE pôsobí ako sito). Výsledkom bude to, že veľké proteíny zostanú blízko začiatku gélu, zatiaľ čo malé proteíny sa presunú ďalej do PAGE.

SDS-PAGE môžete vidieť v nasledujúcom videu: